關(guān)鍵詞：雙路雙光束紫外可見分光光度計(jì)；苯酚；

美析儀器：UV-1700PC；

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

1、了解紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法

2、熟悉定性、定量測定的方法

二、實(shí)驗(yàn)原理

紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry)，它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價(jià)電子在電子能級間的躍遷，是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過測定分子對紫外光的吸收，可以對大量的無機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測定。

苯酚是一種劇毒物質(zhì)，可以致癌，已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超標(biāo)，就會(huì)產(chǎn)生很大的毒害作用。苯酚在紫外光區(qū)的大吸收波長λmax=270nm。對苯酚溶液進(jìn)行掃描時(shí)，在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。

定性分析時(shí)，可在相同的條件下，對標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長掃描，通過比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對未知樣進(jìn)行鑒定。在沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下，可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。

定量分析是在270nm處測定不同濃度苯酚的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值，并自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相同的條件下測定未知樣品的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中苯酚的含量。

三、儀器與試劑

1．UV-1700PC型紫外可見分光光度計(jì)（美析儀器）

2．容量瓶（1000ml、250ml）

3．比色管（50ml）

4．吸量管（5ml、10ml）

5．苯酚（AR）

準(zhǔn)確稱取苯酚1.000g于200ml蒸餾水中，溶解后定量轉(zhuǎn)移到1000ml的容量瓶中，作為儲(chǔ)備液。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1．打開儀器及計(jì)算機(jī)、顯示器、打印機(jī)電源，進(jìn)入軟件操作系統(tǒng)，待儀器自檢結(jié)束，點(diǎn)擊OK，進(jìn)入操作主頁面。

2．波長掃描

(1)確定波長掃描參數(shù)：

光譜帶寬2.0nm

光度測量形式 吸光值

掃描范圍 200～500nm

掃描速度 1000nm/min

數(shù)據(jù)間隔點(diǎn) 1nm

存儲(chǔ)文件 選擇路徑和文件名

(2)做基線

將盛有參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴罚_始進(jìn)行基線掃描

(3)波長掃描

將盛有樣品和參比液的比色皿分別放入?yún)⒈裙饴泛蜆悠饭饴?，點(diǎn)擊開始掃描

(4)定性分析

將試樣的波長掃描圖與已知樣的在相同條件下的波長掃描圖或已知的譜圖相比較，對試樣進(jìn)行定性分析

3．定量分析

(1) 標(biāo)準(zhǔn)系列的配制

于5支50ml的比色管中，用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。

(2) 確定定量分析參數(shù)

設(shè)置a：方法 對每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的重復(fù)讀取次數(shù) 1

對每個(gè)樣品的重復(fù)讀取次數(shù) 1

是否需要測量標(biāo)準(zhǔn)樣品 需要

校正曲線 線性

計(jì)算方式 用峰高計(jì)算定量的數(shù)值

b：樣品 總共測量樣品的個(gè)數(shù) 6

輸入待測樣品的名稱 苯酚

樣品標(biāo)簽從第幾號開始編輯 1

輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度值

在std欄中對標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行標(biāo)識(shí)

c：質(zhì)量控制 需要質(zhì)量控制

對有問題的測量結(jié)果標(biāo)記后繼續(xù)測量

輸入允許的大濃度

輸入允許的低濃度

d：儀器 狹縫 2.0nm

測定形式 吸光值

強(qiáng)度倍數(shù) 1

工作波長 270nm

積分時(shí)間 5s

把空白液注入兩個(gè)比色皿內(nèi)，并分別放入?yún)⒈群蜆悠饭饴?，?ldquo;zero”進(jìn)行調(diào)零，然后按“OK”

e：報(bào)告 需要報(bào)告 要在線報(bào)告

f：結(jié)果儲(chǔ)存 輸入選擇的路徑與文件名

(3)開始定量測量，按照提示放入各樣品

(4)觀察標(biāo)準(zhǔn)、樣品及校正曲線

關(guān)鍵詞：雙路雙光束紫外可見分光光度計(jì)；苯酚；

美析儀器：UV-1700PC